膜結合顆粒甲烷單加氧酶(pMMO)可以催化甲烷氧化為甲醇。銅是pMMO活性所必需的,幾十年的結構和光譜研究試圖在三個候選位點中鑒定活性位點:CuB、CuC和CuD位點。美國西北大學Amy C. Rosenzweig、Brian M. Hoffman最近表明,將pMMO重建成天然脂質納米盤可以穩(wěn)定其結構并恢復其活性。
本文要點:
1) 作者將這種活性樣品與2,2,2-三氟乙醇進行培養(yǎng),該產物類似物可用作活性位點探針。作者用脈沖電子核雙共振光譜和冷凍電子顯微鏡觀察了2,2,2-三氟乙醇和CuD位點之間的相互作用,表明CuD是甲烷氧化的位點。
2) 此外,作者發(fā)現(xiàn)在平行樣品上使用這些正交技術是一種有效的方法,其可以避免解釋金屬酶冷凍電子顯微鏡圖譜的困難。
Frank J. Tucci et.al Product analogue binding identifies the copper active site of particulate methane monooxygenase Nature Catalysis 2023
DOI: 10.1038/s41929-023-01051-x
https://doi.org/10.1038/s41929-023-01051-x