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Nature Biomed. Eng.:通過力觸發(fā)的Cas12a介導(dǎo)的熒光報(bào)告鏈催化裂解檢測(cè)細(xì)胞牽引力
Natt Natt 2023-11-26

細(xì)胞受體產(chǎn)生的分子力是罕見和短暫的,因此難以檢測(cè)。鑒于此,埃默里大學(xué)Khalid Salaita、Roman Sniecinski等人報(bào)道了一種利用CRISPR相關(guān)蛋白12a(Cas12a)來擴(kuò)增對(duì)由多達(dá)50個(gè)粘附細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞牽引力的檢測(cè)的測(cè)定。

該測(cè)定涉及固定用細(xì)胞受體特異性配體修飾的DNA雙鏈體。數(shù)十皮牛頓的牽引力觸發(fā)雙鏈體的脫氮,暴露出一條神秘的Cas12激活鏈,該鏈引發(fā)Cas12介導(dǎo)的熒光報(bào)告鏈的無差別切割。

研究人員使用該測(cè)定法,使用單次抽血中的人類血小板進(jìn)行了數(shù)百次力測(cè)量,以提取一組抗血小板藥物的個(gè)性化劑量-反應(yīng)曲線和一半最大抑制濃度。對(duì)于7名接受過體外循環(huán)的患者,血小板功能障礙與需要輸注血小板以限制出血密切相關(guān)。Cas12a介導(dǎo)的細(xì)胞牽引力檢測(cè)可用于評(píng)估細(xì)胞狀態(tài),并篩選調(diào)節(jié)細(xì)胞力學(xué)的基因、細(xì)胞粘附配體、藥物或代謝產(chǎn)物。

 


參考文獻(xiàn):

Duan, Y., Szlam, F., Hu, Y. et al. Detection of cellular traction forces via the force-triggered Cas12a-mediated catalytic cleavage of a fluorogenic reporter strand. Nat. Biomed. Eng 7, 1404–1418 (2023).

https://doi.org/10.1038/s41551-023-01114-1


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