重組酶因其多樣化的功能和特異性而受到關注，并且通常是生物催化中更環保的替代品。這種情況使得從宿主細胞和其他雜質中純化重組酶變得至關重要。主要目標是分離感興趣的純酶并確保其在環境條件下的穩定性。共價有機框架(COF)以其良好的有序結構和滲透性而聞名，為純化組氨酸標簽(His標簽)酶提供了一種有前途的方法。此外，將酶固定在COF中代表了多相生物催化領域的一個不斷發展的領域。
在這項研究中，印度科學教育研究所Satyadip Paul，Supratim Datta，Rahul Banerjee開發了一種基于流的技術，利用注入鎳的共價有機框架(Ni-TpBpyCOF)來結合兩個不同的過程：同時純化His標記的酶和酶的固定化。
文章要點
1）研究工作主要集中于純化三種組標記酶β-葡萄糖苷酶、纖維二糖水解酶和內切葡聚糖酶以及兩種不同分子量的蛋白質，即綠色熒光蛋白(27kDa)和BGRho(88kDa)。
2）研究人員采用Ni-TpBpy作為列矩陣來展示我們系統的多功能性。此外，成功獲得了固定有酶的Ni-TpBpyCOF，它可以作為對硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷和羧甲基纖維素水解的非均相催化劑。這些固定化酶表現出與游離酶相當的催化活性，并具有可回收性和在環境條件下長期（60至90天）穩定性增強的優點。這與游離酶形成鮮明對比，游離酶不能隨著時間的推移有效地保持其活性。
參考文獻
Satyadip Paul, et al, Covalent Organic Frameworks for the Purification of Recombinant Enzymes and Heterogeneous Biocatalysis, J. Am. Chem. Soc., 2023
DOI: 10.1021/jacs.3c11169
https://doi.org/10.1021/jacs.3c11169
