熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization，FISH)是一種被廣泛應用于檢測細胞內核酸的技術。然而，由于存在熒光強度較低和背景自發熒光等問題，因此其檢測低拷貝核酸的有效性仍會受到很大的限制。有鑒于此，悉尼科技大學金大勇院士和Le Zhang設計了一種具有高靈敏度的鑭系配合物增強的生物正交支化DNA擴增(LEBODA)方法，并將其用于在單細胞中進行原位核酸檢測。
本文要點：
（1）該方法利用了兩個級別的信號放大。首先，它利用點擊化學將大量的橋接探針與靶點識別探針進行直接連接，以實現信號強度的初始提升。其次，它將高密度的鑭系配合物整合到每個橋接探針中，以實現二次放大。研究發現，與RNAscope方法中使用的傳統“double Z”探針相比，LEBODA可通過點擊化學方法實現RNA檢測信號的單次增強（4倍）。
（2）研究者利用SARS-CoV-2假病毒感染的HeLa細胞證明了LEBODA在感染率低至20%的罕見人群中能夠有效實現對病毒感染細胞的檢測。實驗結果表明，LEBODA方法適用于DNA-FISH和單分子RNA-FISH以及其它基于雜交的信號放大方法。綜上所述，該研究設計的LEBODA方法在生物分子敏感檢測方面具有重要的應用潛力。
Fang Zhao. et al. Lanthanide-Complex-Enhanced Bioorthogonal Branched DNA Amplification. Analytical Chemistry. 2024
DOI: 10.1021/acs.analchem.3c04274
https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acs.analchem.3c04274
