熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)報(bào)告子通常用于核酸擴(kuò)增測(cè)試的最后階段,以指示核酸靶標(biāo)的存在,其中熒光通過切割FRET報(bào)告子的核酸酶恢復(fù)。然而,在制造過程中對(duì)雙重標(biāo)記和純化的需要導(dǎo)致FRET報(bào)告子的高成本。在這里,得克薩斯大學(xué)奧斯汀分校Hsin-Chih Yeh報(bào)道了一種低成本的銀納米團(tuán)簇報(bào)告子,它不依賴于FRET作為開/關(guān)切換機(jī)制,而是依賴于在核酸酶消化時(shí)導(dǎo)致熒光顏色變化的團(tuán)簇轉(zhuǎn)化過程。
本文要點(diǎn):
1) ?在報(bào)告子切割時(shí),作者觀察到發(fā)射中的一個(gè)90nm紅移,這是通過簡(jiǎn)單的供體猝滅劑FRET報(bào)告子無法實(shí)現(xiàn)的結(jié)果。電噴霧電離-質(zhì)譜分析結(jié)果表明,銀納米團(tuán)簇從Ag13到Ag10的化學(xué)計(jì)量變化是報(bào)告基因消化后觀察到的發(fā)射顏色變化的原因。
2) 該研究表明,DNA模板化的銀納米簇探針可以成為檢測(cè)核酸酶活性的多功能報(bào)告子,并為核酸酶和金屬DNA納米材料之間的相互作用提供了重要見解。
Soonwoo Hong et.al A non-FRET DNA reporter that changes fluorescence colour upon nuclease digestion Nature Nanotechnology 2024
DOI: 10.1038/s41565-024-01612-6
https://doi.org/10.1038/s41565-024-01612-6