熒光共振能量轉移(FRET)報告基因通常用于核酸擴增測試的最后階段,以指示核酸靶標的存在,其中熒光由切割FRET報告基因的核酸酶恢復。然而,在制造過程中需要雙重標記和純化導致FRET報告基因的高成本。
德州大學奧斯丁分校Hsin-Chih Yeh等展示了一種低成本的銀納米簇報告分子,它不依賴FRET作為開關機制,而是依賴于在核酸酶消化時導致熒光顏色變化的簇轉化過程。
本文要點:
(1)
值得注意的是,在報道分子裂解時觀察到90 nm的發射紅移,這是簡單的供體-淬滅劑FRET報道分子無法實現的結果。電噴霧電離-質譜結果表明,銀納米團簇從Ag13(在完整的DNA宿主中)到Ag10(在片段中)的化學計量變化可能是報告酶消化后觀察到的發射顏色變化的原因。
(2)
作者的結果表明,DNA模板銀納米團簇探針可以成為檢測核酸酶活性的多功能報告分子,并為核酸酶和金屬-DNA納米材料之間的相互作用提供了見解。
參考文獻:
Hong, S., Walker, J.N., Luong, A.T. et al. A non-FRET DNA reporter that changes fluorescence colour upon nuclease digestion. Nat. Nanotechnol. (2024).
DOI: 10.1038/s41565-024-01612-6
https://doi.org/10.1038/s41565-024-01612-6