單分子水平的多重實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)可以揭示混合物和其他復(fù)雜樣品中多種分子物種的化學(xué)計(jì)量、動(dòng)力學(xué)和相互作用。然而，由于低信噪比、高光譜重疊以及需要保持染料的化學(xué)兼容性，基于熒光的傳感通常僅限于一次檢測(cè)3-4種顏色。近日，芝加哥大學(xué)Allison H. Squires設(shè)計(jì)了幾十種復(fù)合熒光標(biāo)記，并將其稱為FRET熒光，其可用于單分子水平的多重光譜測(cè)量。
本文要點(diǎn)：
1) FRET熒光是由三種化學(xué)成分（DNA、Cy3和Cy5）構(gòu)建的緊湊納米結(jié)構(gòu)，由于幾何形狀、熒光團(tuán)附著化學(xué)和DNA序列的變化，FRET熒光具有可調(diào)的光譜性質(zhì)。
2) 此外，FRET熒光可以標(biāo)記和檢測(cè)低濃度（<100?fM）mRNA、dsDNA和使用反布朗電動(dòng)陷阱蛋白質(zhì)的混合物。除了識(shí)別每個(gè)FRET熒光的獨(dú)特光譜特征外，該陷阱還將附著在目標(biāo)物上的FRET熒光與未結(jié)合的FRET熒光體區(qū)分開(kāi)來(lái)，從而實(shí)現(xiàn)免清洗傳感。
Jiachong Chu et.al Single-molecule fluorescence multiplexing by multi-parameter spectroscopic detection of nanostructured FRET labels Nature Nanotechnology 2024
DOI: 10.1038/s41565-024-01672-8
https://doi.org/10.1038/s41565-024-01672-8
