確定標記與靶比，也稱為標記程度（DOL），對于定量熒光顯微鏡至關重要，具有最小非特異性標記的高DOL有利于熒光顯微鏡表征。然而，目前還沒有用于測量細胞特異性標記效率的強大、通用和易于使用的工具。鑒于此，來自德國海德堡大學的Dirk-Peter Herten等人開發了一種名為蛋白質標簽DOL（ProDOL）的DOL測定技術。
文章要點：
1) 該研究開發的這一技術能夠快速定量和優化蛋白質標簽標記，通過使用ProDOL，研究可以很容易地評估影響標記效率的各種因素，包括底物類型、孵育時間和濃度，以及樣品固定和細胞類型；
2) 此外，該研究通過應用ProDOL來研究人類免疫缺陷病毒-1致病因子Nef如何調節CD4 T細胞活化，測量信號微簇中銜接蛋白SLP-76的總拷貝數和活化拷貝數，研究證實ProDOL是一種通用且高效的標記校準工具，能夠確定標記效率、優化策略和定量蛋白質化學計量。
參考資料：
Tashev, S.A., Euchner, J., Yserentant, K. et al. ProDOL: a general method to determine the degree of labeling for staining optimization and molecular counting. Nat Methods (2024).
10.1038/s41592-024-02376-6
https://doi.org/10.1038/s41592-024-02376-6
